产品介绍
概述
概要?
脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DeoxynivaLenoL）又称呕吐毒素 （Vomitoxin）属于霉菌的单端孢菌素族，由某些镰刀霉真菌属产生。呕吐毒素多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实样本中，由于其具有强的细胞毒性及免疫抑制性质，对人类及动物的健康构成威胁。?
本试剂盒是应用ELISA最新技术研发而成的毒素检测产品，与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点，操作时间需20min，能减少工作强度和操作误差。?
实验原理?
本试剂盒采用间接竞争ELISA 方法，在酶标板微孔上预包被呕吐毒素抗原，样本中的呕吐毒素和微孔上预包被的抗 原竞争呕吐毒素抗体（抗试剂），同时呕吐毒素抗体与酶标二抗（酶标物）相结合，经TMB 底物显色，样本吸光度值与其所含呕吐毒素含量呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的校准系数，即可得出样本中呕吐毒素的含量。?
贮藏条件及有效期?
贮藏条件：保存试剂盒于 2~8℃。?
有效期：该产品有效期为 12 个月。
检测步骤
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25℃）平 衡 1h 以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。?
2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于 2～8℃。切 勿冷冻。?
3、洗涤液在使用前也需回温。?
4、请注意反应温度不宜过高，控制温度在 20~25℃。?
5、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标 准品做 2 孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置（建 议在一次实验过程中，若使用 8 道移液器则标准品和样本 的总量不宜超过 48 个，即不宜超过 6 个检测条；建议若 使用单道移液器则不宜超过 16 个，即不宜超过 2 个检测 条）。?
6、加标准品/样本：加入标准品或样本 50μL 到对应的微孔中， 加酶标物 50μL /孔，再加入抗试剂 50μL /孔（加抗试剂时 请使用多道移液器），轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置 25℃避光环境中反应 15min。?
7、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液 250μL /孔，充分洗涤 4~5 次，每次间隔 10s，在吸水纸上拍干（拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。?
8、显色：加入底物液 100μL /孔（加底物液时请使用多道移 液器），用盖板膜盖板后置 25℃避光环境反应 5min。?
9、测定：加入终止液 50μL /孔（加终止液时请使用多道移液 器），轻轻振荡混匀，设定酶标仪于 450nm 处（建议用 双波长 450/630nm 检测，请在 5min 内读完数据），测定 每孔 OD 值。
注意事项
1. 试剂及样本没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的 OD 值偏低。
2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲 线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即 进行下一步操作。
3. 每加一种试剂前需将其摇匀。
4. 反应终止液为 2M 硫酸，避免接触皮肤。
5. 不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期 的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会 引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试 剂。
6.储存条件:保存试剂盒于 2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板 放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。
7. 试剂变质的迹象:发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0 标准 的吸光度（450/630nm）值小于 0.5（A450nm<0.5）时，表示 试剂可能变质。
8. 加入底物液后，一般显色时间为 5min。若颜色较浅，可延长反应时间到 7min。反之，则减短反应时间。
9. 浓缩洗涤液如有结晶属正常现象，请加热溶解后使用。
10. 该方法为筛选方法，如遇阳性样本请用确证方法确认。
11. 该试剂盒最佳反应温度为 25℃，温度过高或过低将导致 检测吸光度值和灵敏度发生变化。
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